| Resumo: |
Despite the fact that the involvement of environmental factors in the physiology of the japanese oyster C. gigas is fully described, regulatory peptides are not known. In this study, we focused on peptidergic control of egg-laying. In order to characterize peptides involved in the regulation of egg-laying in C. gigas, the cuttlefish S. officinalis was used as a model. Firstly, regulatory peptides were investigated in the cuttlefish by peptidomic analysis. This approach led to the identification of eleven new ovarian regulatory peptides. Based on conserved tags, these peptides have been classified into two families: the SepCRPs (Sepia Capsule Releasing Peptides) and the OJPs (Ovarian Jelly Peptides). Released by oocytes into the genital coelom, they are responsible for the storage of oocytes before mating and external egg capsule secretion. In a second step, peptides related to SepCRPs and OJPs were investigated in oysters by means of mass spectrometry, but without any success. Nevertheless, using a myotropic bioassay based on recorded cuttlefish oviduct contractions, the first ovarian regulatory peptide from the oyster was characterized: PIESVD. This peptide triggers adductor muscle contractions in mature females, these contractions being involved in oocyte release. Subsequently, peptidomic analysis of male genital products led to the identification of APGWamide in both cuttlefish and oysters. This neuropeptide triggers oocyte release in both species. Thus, in commercial and experimental hatcheries, APGWamide and PIESVD could be used for the selection of mature females to perform genetic manipulations and in vitro fertilizations.
Si l'influence des paramètres environnementaux sur la physiologie de l'huître creuse C. gigas a fait l'objet de nombreuses études, les acteurs moléculaires internes sont encore mal connus. Dans cette étude, nous nous sommes intéressés au contrôle peptidergique de la ponte ovulaire. Afin de caractériser chez l'huître creuse des peptides impliqués dans la régulation de cette étape, la seiche S. officinalis a été utilisée comme modèle. Dans un premier temps, des peptides régulateurs ont été recherchés chez la seiche, par une approche originale de type peptidomique. Celle-ci a permis de caractériser onze nouveaux régulateurs ovariens qui se répartissent, sur le plan structural, en deux familles : les SepCRPs (Sepia Capsule Releasing Peptides) et les OJPs (Ovarian Jelly Peptides). Libérés par les ovocytes dans les voies génitales, ils participent au stockage des ovocytes avant la ponte et à la sécrétion de la capsule externe de l'oeuf. Dans un deuxième temps, des peptides apparentés aux peptides de seiche ont été recherchés chez l'huître. Cette stratégie n'ayant pas aboutie, l'utilisation d'un bioessai basé sur les contractions de l'oviducte de seiche a permis d'identifier le premier peptide régulateur impliqué dans l'émission des ovocytes chez l'huître creuse : PIESVD. Ce peptide module spécifiquement les contractions du muscle adducteur chez les femelles matures, contractions qui sont à l'origine de l'évacuation des ovocytes dans le milieu environnant. Parallèlement, l'APGWamide a été identifié dans les produits génitaux mâles chez la seiche et chez l'huître par analyse du peptidome. Ce neuropeptide module le transport des ovocytes chez ces deux espèces. Ces résultats ouvrent de nouvelles perspectives pour les écloseries commerciales et expérimentales, en particulier pour l'isolement des femelles matures en vue de manipulations génétiques et fécondations in vitro.
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